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HPV病毒的分子生物學(xué)探究 楊永強(qiáng) 目錄 一、高、中、低危型HPV 二、HPV檢測(cè)在臨床各階段中的意義 三、HPV的檢測(cè) 什么是HPV? HPV的分型 目前研究中，與人類癌癥存在相關(guān)性的病毒包括： 目前真正通過體外病理模型確認(rèn)的只有HPV16，可導(dǎo)致宮頸癌。 并且在HPV這一病毒種屬中真正致癌的具體病毒型別仍尚待研究，已確認(rèn)的致癌型別有，HPV16，18，31，45. （其中HPV16經(jīng)體外病理模型證實(shí)，HPV18，45，31經(jīng)流行病學(xué)證實(shí)。） HPV的分型 高危型HPV 中危型HPV 低危型HPV ★高、中、低危型不是依據(jù)其致癌性劃分，而是依據(jù)其致癌的可能性劃分的。 所以說，高危型不代表是致癌型，只是表示其致癌的危險(xiǎn)性高。 人們最早發(fā)現(xiàn)的HPV型別是HPV6（Gissmann and zur Hausen，1980）和HPV11 (Gissmann et al.，1982) ，但它們并不能導(dǎo)致宮頸癌。 在研究HPV6和HPV11的致癌性過程中，才發(fā)現(xiàn)了真正的宮頸癌元兇HPV16 (Dürst et al.，1983)、HPV18 (Boshart et al.，1984) 。 HPV的致癌性研究 致癌因子可能包含所有的高危型HPV，但并不是所有的高危型HPV都已被確認(rèn)為有必然的致癌性。 目前確認(rèn)的是HPV16、18、31、45。 高危型HPV病毒致病機(jī)理 —L1、L2 、E6、E7基因的功能 HPV檢測(cè)在臨床各階段中的意義 檢測(cè)對(duì)象：宮頸分泌物中的脫落細(xì)胞 分泌物檢測(cè)的規(guī)范化 —內(nèi)標(biāo)的意義 現(xiàn)在已經(jīng)世界衛(wèi)生組織采用和確認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)為 β-globin gene（β-球蛋白基因） β-球蛋白基因（β-globin gene）是一種存在于上皮細(xì)胞中的管家基因，可作為宮頸上皮細(xì)胞的身份證，它的存在標(biāo)志著臨床所取標(biāo)本中一定含有宮頸上皮細(xì)胞，從而規(guī)范地避免了因臨床取樣未獲得足夠的（針對(duì)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)）宮頸上皮細(xì)胞而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的假陰性問題。 HPV檢測(cè)在臨床各階段中的意義 分型的同時(shí)定量 而但由于取樣等因素導(dǎo)致取到可檢測(cè)的宮頸脫落細(xì)胞不同，相應(yīng)的病毒載量完全無(wú)可比性。而當(dāng)我們引入內(nèi)標(biāo)后，通過相對(duì)定量值和內(nèi)標(biāo)值之間的換算，可得到該患者病毒載量的絕對(duì)定量值，甲為2×103拷貝數(shù)，乙為2×106拷貝數(shù)。 此時(shí)我們可得到準(zhǔn)確的結(jié)果提示：乙患者感染HPV16型病毒載量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于甲，且乙患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)屬高度。 雙色熒光，一管檢測(cè)多個(gè)型別 每個(gè)標(biāo)本用3次實(shí)時(shí)平行擴(kuò)增反應(yīng)，通過兩種熒光基團(tuán)對(duì)八種高危型HPV進(jìn)行檢測(cè)。 基因分型: 主要高危型: HPV16，18， 45， 31. (建議對(duì)陽(yáng)性患者進(jìn)行下一步的檢查，如: TCT，陰道鏡，或病理活檢) 次要高危型: HPV33，52，58，67. (建議關(guān)注陽(yáng)性患者的病毒量) 一種即高效又實(shí)用的臨床檢測(cè)方法 不僅分型，而且定量 雙熒光圖 深圳市醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)第十屆年會(huì)暨第四屆深港澳檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)圓滿成功！Kwk紅軟基地

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