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黃曲霉毒素b1的測(cè)定PPT課件下載

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儀器設(shè)備PPT

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黃曲霉毒素b1的測(cè)定PPT課件

這是一個(gè)關(guān)于黃曲霉毒素b1的測(cè)定PPT課件,包括了黃曲霉毒素,發(fā)現(xiàn)歷史,發(fā)展史,基本認(rèn)識(shí),物質(zhì)特點(diǎn),檢測(cè)試劑,注意事項(xiàng),主要來(lái)源,分布特點(diǎn),物質(zhì)代謝,造成危害,抵抗方法,超標(biāo)事件等內(nèi)容。簡(jiǎn)介:【黃曲霉素B1 ......訂-貨-加 ⓠⓠ:⒈⒎⒎⒏⒌⒐⒏⒏⒍ ...數(shù)量有限】黃曲霉素B1知識(shí)黃曲霉毒素黃曲霉毒素(AFT)是一類(lèi)化學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)似的化合物,均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉 (aspergillus flavus))寄生曲霉 (a.parasiticus))產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物,在濕熱地區(qū)食品和飼料中出現(xiàn)黃曲霉毒素的機(jī)率最高。發(fā)現(xiàn)歷史 20世紀(jì)60年代在英國(guó)發(fā)生的十萬(wàn)只火雞突發(fā)性死亡事件被確認(rèn)與從巴西進(jìn)口的花生粕有關(guān).進(jìn)一步的 黃曲霉毒素B1 調(diào)研證明,這些花生粕被一種來(lái)自真菌的有毒物質(zhì)污染這些研究工作最終使人們發(fā)現(xiàn)了黃曲霉(Aspergillus.flavus)產(chǎn)生的有毒代謝物質(zhì)。黃曲霉毒素(Aflatoxins).是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物。特曲霉也能產(chǎn)生黃曲霉毒素,但產(chǎn)量較少.產(chǎn)生的黃曲霉毒素主要有B1,B2,G1,G2 以及另外兩種代謝產(chǎn)物M1,M2.其中M1 和M2是從牛奶中分離出來(lái)的.B1,B2,G1,G2,M1 和 M2 在分子結(jié)構(gòu)上十分接近.。發(fā)展史 1960年,英國(guó)發(fā)現(xiàn)有10萬(wàn)只火雞死于一種以前沒(méi)見(jiàn)過(guò)的病,被稱(chēng)為“火雞X病”,再后來(lái)鴨子也被波及。追根溯源,最大的嫌疑是飼料。這些可憐的火雞和鴨子吃的是花生餅;ㄉ炇腔ㄉビ椭笫O碌臍?jiān),富含蛋白質(zhì),是很好的禽畜飼料;菊J(rèn)識(shí) 1993年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為1類(lèi)致癌物,是一種毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì).黃曲霉毒素的危害性在于對(duì)人及動(dòng)物肝臟組織有破壞作用,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致肝癌甚至死亡.在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見(jiàn),其毒性和致癌性也最強(qiáng). B1是最危險(xiǎn)的致癌物,經(jīng)常在玉米,花生,棉花種子,一些干果中常能檢測(cè)到。它們?cè)谧贤饩照射下能產(chǎn)生熒光,根據(jù)熒光顏色不同,將其分為B族和G族兩大類(lèi)及其衍生物。AFT目前已發(fā)現(xiàn)20余種,歡迎點(diǎn)擊下載黃曲霉毒素b1的測(cè)定PPT課件哦。

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簡(jiǎn)介:【黃曲霉素B1 ......訂-貨-加 ⓠⓠ:⒈⒎⒎⒏⒌⒐⒏⒏⒍ ...數(shù)量有限】黃曲霉素B1知識(shí)黃曲霉毒素黃曲霉毒素(AFT)是一類(lèi)化學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)似的化合物,均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉 (aspergillus flavus))寄生曲霉 (a.parasiticus))產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物,在濕熱地區(qū)食品和飼料中出現(xiàn)黃曲霉毒素的機(jī)率最高。發(fā)現(xiàn)歷史 20世紀(jì)60年代在英國(guó)發(fā)生的十萬(wàn)只火雞突發(fā)性死亡事件被確認(rèn)與從巴西進(jìn)口的花生粕有關(guān).進(jìn)一步的 黃曲霉毒素B1 調(diào)研證明,這些花生粕被一種來(lái)自真菌的有毒物質(zhì)污染這些研究工作最終使人們發(fā)現(xiàn)了黃曲霉(Aspergillus.flavus)產(chǎn)生的有毒代謝物質(zhì)。黃曲霉毒素(Aflatoxins).是黃曲霉和寄生曲霉的代謝產(chǎn)物。特曲霉也能產(chǎn)生黃曲霉毒素,但產(chǎn)量較少.產(chǎn)生的黃曲霉毒素主要有B1,B2,G1,G2 以及另外兩種代謝產(chǎn)物M1,M2.其中M1 和M2是從牛奶中分離出來(lái)的.B1,B2,G1,G2,M1 和 M2 在分子結(jié)構(gòu)上十分接近.。發(fā)展史 1960年,英國(guó)發(fā)現(xiàn)有10萬(wàn)只火雞死于一種以前沒(méi)見(jiàn)過(guò)的病,被稱(chēng)為“火雞X病”,再后來(lái)鴨子也被波及。追根溯源,最大的嫌疑是飼料。這些可憐的火雞和鴨子吃的是花生餅;ㄉ炇腔ㄉビ椭笫O碌臍?jiān),富含蛋白質(zhì),是很好的禽畜飼料;菊J(rèn)識(shí) 1993年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為1類(lèi)致癌物,是一種毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì).黃曲霉毒素的危害性在于對(duì)人及動(dòng)物肝臟組織有破壞作用,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致肝癌甚至死亡.在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見(jiàn),其毒性和致癌性也最強(qiáng). B1是最危險(xiǎn)的致癌物,經(jīng)常在玉米,花生,棉花種子,一些干果中常能檢測(cè)到。它們?cè)谧贤饩照射下能產(chǎn)生熒光,根據(jù)熒光顏色不同,將其分為B族和G族兩大類(lèi)及其衍生物。AFT目前已發(fā)現(xiàn)20余種。AFT主要污染糧油食品、動(dòng)植物食品等;如花生、玉米,大米、小麥、豆類(lèi)、堅(jiān)果類(lèi)、肉類(lèi)、乳及乳制品、水產(chǎn)品等均有黃曲霉毒素污染。其中以花生和玉米污染最嚴(yán)重。家庭自制發(fā)酵食品也能檢出黃曲霉毒素,尤其是高溫高濕地區(qū)的糧油及制品種檢出率更高。 黃曲霉毒素(Aflatoxins)CAS號(hào) 1402-68-2,是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類(lèi)似的化合物,目前已分離鑒定出12 黃曲霉毒素B2 種包括B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇.黃曲霉毒素的的基本結(jié)構(gòu)為二呋喃環(huán)和香豆素,B1是二氫呋喃氧雜萘鄰?fù)难苌?即含有一個(gè)雙呋喃環(huán)和一個(gè)氧雜萘鄰?fù)ㄏ愣顾兀?前者為基本毒性結(jié)構(gòu)后者與致癌有關(guān).M1是黃曲霉毒素B1在體內(nèi)經(jīng)過(guò)羥化而衍生成的代謝產(chǎn)物.黃曲霉毒素的主要分子型式含 B1,B2,G1,G2,M1,M2等.其中M1和M2 主要存在于牛奶中.B1為毒性及致癌性最強(qiáng)的物質(zhì). 物質(zhì)特點(diǎn)物化特性 在紫外線下黃曲霉毒素B1,B2發(fā)藍(lán)色熒光黃曲霉毒素G1,G2發(fā)綠色熒光.黃曲霉毒素的相 黃曲霉毒素G2 對(duì)分子量為312-346.難溶于水易溶于油,甲醇丙酮和氯仿等有機(jī)溶劑,但不溶于石油醚己烷和乙醚中.一般在中性溶液中較穩(wěn)定,但在強(qiáng)酸性溶液中稍有分解在pH9-10的強(qiáng)堿溶液中分解迅速.其純品為無(wú)色結(jié)晶,耐高溫黃曲霉毒素B1的分解溫度為268℃紫外線對(duì)低濃度黃曲霉毒素有一定的破壞性. 毒性極強(qiáng) 遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氰化物、砷化物和有機(jī)農(nóng)藥的毒性,其中以B1毒性最大。當(dāng)人攝入量大時(shí),可發(fā)生急性中毒,出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生。當(dāng)微量持續(xù)攝入,可造成慢性中毒,生長(zhǎng)障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。AFT的致癌力也居首位,是目前已知最強(qiáng)致癌物之一。檢測(cè)試劑操作步驟: 1.將所需試劑從微孔板中取出,放置室溫(20~25℃)30min以上,液體試劑使用前均須搖勻。 2.取出所需數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板與干燥劑一起重新真空密封,保存于2~8℃。不要冷凍。 3.洗滌工作液在使用前也需回溫。 [1] 4.將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。 5.加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml到對(duì)應(yīng)的微孔中,加入酶標(biāo)物50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境中反應(yīng)30min。 6.小心揭開(kāi)蓋板膜,用洗滌工作液充分洗滌300ml/孔,洗板5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干。 7.加入顯色液100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光環(huán)境反應(yīng)30min。 8.加終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)酶標(biāo)儀于450nm處讀每孔OD值。注意事項(xiàng) 1.室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有恢復(fù)到室溫(20~25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。 2.在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。 3.每種試劑使用前均需搖勻。 4.反應(yīng)終止液為2M鹽酸,避免接觸皮膚。 5.不要使用過(guò)了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。 6.儲(chǔ)存條件 7.試劑變質(zhì)的跡象:顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。 8.加入顯色液后,一般顯色時(shí)間為15~30min。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到35min(或更長(zhǎng)),但不得超過(guò)40min。反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。 9.該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。試劑盒保存于2~8℃,不要冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的顯色劑對(duì)光敏感,因此要避光保存。主要來(lái)源黃曲霉毒素是黃曲霉、寄生曲霉等產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。當(dāng)糧食未能及時(shí)曬干及儲(chǔ)藏不當(dāng)時(shí),往往容易被黃曲霉或寄生曲霉污染而產(chǎn)生此類(lèi)毒素。分布特點(diǎn)黃曲霉毒素存在于土壤,動(dòng)植物各種堅(jiān)果,特別是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調(diào)味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經(jīng)常發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素。一般在熱帶和亞熱帶地區(qū),食品中黃曲霉毒素的檢出率比較高。在中國(guó),產(chǎn)生黃曲霉毒素的產(chǎn)毒菌種主要為黃曲霉。1980年測(cè)定了從17個(gè)省糧食中分離的黃曲霉1660株,廣西地區(qū)的產(chǎn)毒黃曲霉最多檢出率為58%?偟姆植记闆r為:華中、華南、華北產(chǎn)毒株多,產(chǎn)毒量也大;東北、西北地區(qū)較少。物質(zhì)代謝分布與排泄黃曲霉毒素進(jìn)入機(jī)體后,在肝臟中的量較其他組織器官為高,說(shuō)明肝臟可能受黃曲霉毒素的影響最大。腎臟、脾臟和腎上腺也可檢出,肌肉中一般不能檢出。黃曲霉毒素如不連續(xù)攝入,一般不在體內(nèi)積蓄。一次攝入后約1周即經(jīng)呼吸、尿、糞等將大部分排出。代謝 AFB1在動(dòng)物體內(nèi)經(jīng)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)微粒體混合功能氧化酶系代謝,在微粒體混合功能氧化酶系的作用下AFB1發(fā)生脫甲基、羥化及環(huán)氧化反應(yīng)主要代謝產(chǎn)物為AFM1.AFP1.AFQ1和AFB1-2,3-環(huán)氧化物。造成危害概述黃曲霉毒素對(duì)人和動(dòng)物健康的危害均與黃曲霉毒素抑制蛋白質(zhì)的合成有關(guān).黃曲霉毒素分子中的雙呋喃環(huán)結(jié)構(gòu)是產(chǎn)生毒性的重要結(jié)構(gòu).研究表明,黃曲霉毒素的細(xì)胞毒作用是干擾信息RNA和DNA的合成,進(jìn)而干擾細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成導(dǎo)致動(dòng)物全身性損害(Nibbelink,1988).黃光琪等(1993)研究指出黃曲霉毒素B1能與tRNA結(jié)合形成加成物,黃曲霉毒素-tRNA加成物能抑制tRNA與某些氨基酸結(jié)合的活性對(duì)蛋白質(zhì)生物合成中的必需氨基酸,如賴(lài)氨酸亮氨酸,精氨酸和甘氨酸與tRNA的結(jié)合均有不同的抑制作用,從而在翻譯水平上干擾了蛋白質(zhì)生物合成影響細(xì)胞代謝.. 抵抗方法著名醫(yī)學(xué)雜志Carcinogenesis在2007年刊登了一項(xiàng)研究,其中發(fā)現(xiàn)天然葉綠素可以抑制黃曲霉毒素B1引起的大鼠多器官致癌作用。研究者表示,葉綠素的抗癌機(jī)制可能是因?yàn)樗艽蠓葴p少黃曲霉毒素的吸收率,從而抑制了黃曲霉毒素對(duì)肝臟DNA的加成作用。他們認(rèn)為,葉綠素是一種極好的化學(xué)保護(hù)物質(zhì),對(duì)抗致癌物的作用非常有效,從減少吸收,到減少致癌物與遺傳物質(zhì)的作用,直到減少各組織的癌前病變出現(xiàn),各環(huán)節(jié)都有明顯的效果。當(dāng)然,這只是一項(xiàng)動(dòng)物研究,對(duì)人體來(lái)說(shuō),葉綠素是不是也有同樣的作用呢?在大鼠試驗(yàn)的啟發(fā)下,2009年的Cancer Prevention Research雜志上發(fā)表了一項(xiàng)人體試驗(yàn)研究,它證明,在人類(lèi)志愿者當(dāng)中,葉綠素一樣能夠有效地對(duì)抗黃曲霉毒素的致癌作用。研究者們給志愿者服用微量14C標(biāo)記的黃曲霉毒素B1膠囊,然后正常進(jìn)食和飲水,測(cè)定他們?cè)?2小時(shí)之內(nèi)對(duì)黃曲霉毒素的吸收和代謝情況。過(guò)若干天后,給志愿者同樣服用這種黃曲霉毒素膠囊,但再加上葉綠素或者葉綠酸。結(jié)果和大鼠試驗(yàn)相當(dāng)類(lèi)似,葉綠素和葉綠酸能大大降低黃曲霉毒素的吸收率。超標(biāo)事件 2011年12月24日,國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局公布了近期對(duì)全國(guó)液體乳產(chǎn)品進(jìn)行抽檢結(jié)果的公告,蒙牛乳業(yè)(眉山)有限公司生產(chǎn)的一批次產(chǎn)品被檢出黃曲霉毒素M1超標(biāo)140%。此次涉事的四川眉山工廠在2008年4月全面啟動(dòng),其一期項(xiàng)目總投資3億元,設(shè)計(jì)能力為日處理鮮奶800噸。此事發(fā)生后,蒙牛在25日凌晨及晚上9點(diǎn)鐘兩次連發(fā)道歉聲明。 2011年12月26日,蒙牛副總裁盧建軍解釋稱(chēng),“黃曲霉素是因?yàn)槊忌降靥幩拇ǎ嚓幱晏鞖,個(gè)別供方對(duì)飼料管理不當(dāng),霉變導(dǎo)致牛奶產(chǎn)生黃曲霉素。” 2011年12月27日在植物油產(chǎn)品中, 廣東省有3個(gè)產(chǎn)品的部分批次抽檢不及格,分別是云浮市云城區(qū)滿(mǎn)意花生油廠的花生油(壓榨)、云城區(qū)富盛糧油廠的花生油(壓榨)和高要市孖寶油有限公司的花生油(2.73L/瓶),原因均為黃曲霉毒素B1指標(biāo)不合格。BAu紅軟基地

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