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核酸化學(xué)ppt下載

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2019-03-22
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核酸化學(xué)ppt

這是核酸化學(xué)ppt,包括了核酸概述,核酸的研究歷史和重要性,核酸基本結(jié)構(gòu)單位—核苷酸,DNA的分子結(jié)構(gòu),RNA的分子結(jié)構(gòu),核酸的某些理化性質(zhì)及核酸研究常用技術(shù)等內(nèi)容,歡迎點(diǎn)擊下載。

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第三章 核酸化學(xué) 主要內(nèi)容 目錄 核酸的基本組成單位:核苷酸 主要組成元素:C、H、O、N、P P平均含量:9%~10%,可確定核酸含量 核酸的分類 1944年,Avery的轉(zhuǎn)換轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 重組DNA的操作 核酸的基本結(jié)構(gòu)單位—核苷酸 核苷酸的組成 戊糖 磷 酸 核苷(nucleoside) cAMP cGMP UDPG的結(jié)構(gòu) 第三節(jié) DNA的分子結(jié)構(gòu) DNA酶法序列分析的原理 DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu) Watson 和 Crick 于1953年提出了DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,說明了DNA 的二級(jí)結(jié)構(gòu)。(即B型DNA) Chargaff定則 (1950s,E. Chargaff發(fā)現(xiàn)) DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)(1) DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)(2) DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)(3) DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)(4) 雙螺旋橫截面的直徑約為2 nm,相鄰兩個(gè)堿基平面之間的距離(軸距)為0.34 nm,每10個(gè)核苷酸形成一個(gè)螺旋,其螺距(即螺旋旋轉(zhuǎn)一圈)的高度)為3.4 nm。 DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定因素 DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)的意義 DNA分子間的三鏈結(jié)構(gòu) DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)---超螺旋 核小體盤繞及染色質(zhì)示意圖 真核生物染色體DNA組裝不同層次的結(jié)構(gòu) DNA的存在形式--核小體 真核生物中DNA雙螺旋沿著組蛋白八聚體核心的短軸繞1.75圈,形成左手超螺旋,稱核小體。 染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位是核小體。 串珠狀結(jié)構(gòu)進(jìn)一步卷曲形成螺線管,后者再進(jìn)一步卷曲形成超螺旋管,形成染色單體。 噬菌體T2結(jié)構(gòu) 動(dòng)物病毒切面模式圖 第五節(jié) RNA的分子結(jié)構(gòu) RNA的一級(jí)結(jié)構(gòu) RNA的特點(diǎn)及分類 結(jié)構(gòu)特點(diǎn): 1. 堿基組成:A、G、C、U (A=U/G≡C); 2. 稀有堿基較多,穩(wěn)定性較差,易水解; 3. 多為單鏈結(jié)構(gòu),少數(shù)局部形成螺旋(發(fā)夾結(jié)構(gòu)); 4. 分子較小。 分類: 1. 信使RNA( mRNA) 2. 轉(zhuǎn)運(yùn)RNA ( tRNA) 3. 核糖體RNA (r RNA) 4. 其它RNA Messenger RNA 約占總RNA的3%-5%,含量最少,種類最多。 成熟mRNA不含內(nèi)含子,hnRNA含有。 mRNA從DNA轉(zhuǎn)錄遺傳信息,并作為蛋白質(zhì)合成的模板,決定蛋白質(zhì)的氨基酸順序。 Ribosome RNA 約占全部RNA的80-85%,含量最多。 與多種蛋白質(zhì)結(jié)合成核糖體,后者是合成蛋白質(zhì)的場所。 Transfer RNA 約占總RNA的10-15%,分子最小。 它在蛋白質(zhì)生物合成中起翻譯mRNA信息,并將相應(yīng)的氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體,參與蛋白質(zhì)體的合成。 已知每一個(gè)氨基酸至少有一個(gè)相應(yīng)的tRNA。 tRNA 的結(jié)構(gòu) tRNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 酵母tRNA Ala 的二級(jí)結(jié)構(gòu) tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) rRNA的分子結(jié)構(gòu) rRNA的分子結(jié)構(gòu) mRNA的分子結(jié)構(gòu) 原核細(xì)胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 真核細(xì)胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 第六節(jié) 核酸的性質(zhì)及提取 一、一般物理性質(zhì) 1. DNA白色纖維狀固體,RNA白色粉末狀固 體,都微溶于水,不溶于乙醇,因此常用乙醇來 沉淀DNA ; DNA溶液黏度大于RNA 。 2. DNA難溶于0.14mol/L的NaCl溶液,可溶于 1—2 mol/L的NaCl溶液,RNA則相反,可據(jù)此 分離二者。 3. 加熱條件下, D-核糖+濃鹽酸+苔黑酚 綠色 670nm D-2-脫氧核糖+酸+二苯胺 藍(lán)紫色 595nm 二、核酸的水解 核酸分子中的磷酸二酯鍵可在酸或堿性條件下水解切斷。 DNA和RNA對(duì)酸或堿的耐受程度有很大差別。室溫條件下,DNA在堿中變性,但不水解,RNA水解。 在細(xì)胞內(nèi)核酸分子受DNA酶作用。 三、兩性解離 核酸含酸性的磷酸基團(tuán),又含弱堿性的堿基,為兩性電解質(zhì),可發(fā)生兩性解離; 核酸相當(dāng)于多元酸,pH大于4時(shí),呈陰離子狀態(tài); 等電點(diǎn) 四、紫外吸收 在核酸分子中嘌呤堿和嘧啶堿都含有共軛雙鍵體系,在260 nm有吸收; 可以作為區(qū)別蛋白質(zhì)和對(duì)核酸及其組份定性和定量測定的依據(jù),進(jìn)行核酸純度鑒定,也可作為核酸變性和復(fù)性的指標(biāo)。 DNA的紫外吸收光譜 五、DNA的穩(wěn)定性 是在物理或化學(xué)因素作用下核酸雙螺旋區(qū)的多聚核苷酸鏈間的氫鍵斷裂,變成單鏈結(jié)構(gòu)的過程。 DNA變性的特征 DNA解鏈溫度(熔點(diǎn),Tm ) 溶解曲線與Tm。 增色效應(yīng)與減色效應(yīng) DNA的復(fù)性圖示 2.DNA的復(fù)性條件 4.分子雜交 分子雜交 核酸的變性、復(fù)性和雜交 分子雜交的種類 Southern Blot:DNA-DNA雜交 Northern Blot:DNA-RNA雜交 Western Blot:抗原-抗體進(jìn)行雜交 原位雜交:活體組織上進(jìn)行雜交,顯出熒光 DNA芯片技術(shù) DNA芯片技術(shù)簡介 沉降特性 蔗糖密度梯度超速離心是制備RNA的常用方法之一,利用物質(zhì)在不同梯度溶液中的沉降速度差別進(jìn)行分離,屬于區(qū)帶超速離心法。 氯化銫密度梯度離心是分別DNA常用的方法,它在離心場中可自行調(diào)節(jié)形成濃度梯度,并能保持穩(wěn)定。此法稱為等密度梯度離心。 沉降系數(shù)(S) 九、核酸提取 核酸提取原則:低溫、無菌 DNA提取主要步驟:取材 破碎 加入去污劑(SDS/CTAB) 苯酚和氯仿 調(diào)節(jié)鹽溶液濃度去RNA 乙醇沉淀 檢測(紫外,電泳) RNA提。褐饕茐暮鸵种芌NA酶活性(焦碳酸二乙酯) 復(fù)習(xí)題 第六節(jié) DNA研究進(jìn)展 人類基因組計(jì)劃簡介 (Human Genome Project,HGP) HGP取得的成就 HGP面臨的挑戰(zhàn) DNA芯片技術(shù)簡介 人類將進(jìn)入生物經(jīng)濟(jì)時(shí)代2ZC紅軟基地

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