這是微生物真菌的ppt，包括了真菌概念，原核細(xì)胞型微生物與真核細(xì)胞型微生物比較，基本特性，單細(xì)胞真菌，假菌絲，多細(xì)胞真菌，不同形態(tài)的菌絲具有鑒別意義，無(wú)性孢子，繁殖與培養(yǎng)，真菌的培養(yǎng)特性，致病性，微生物學(xué)檢查法，血清學(xué)方法檢測(cè)真菌抗原成分，防止原則，小結(jié)等內(nèi)容，歡迎點(diǎn)擊下載。

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真 菌 概 述 概 念 真菌(fungus)是一類具有典型細(xì)胞核，有核膜和核仁，胞漿內(nèi)有完整的細(xì)胞器，無(wú)根、莖、葉，不含葉綠素，無(wú)光合色素，細(xì)胞壁含幾丁質(zhì)和纖維素的單細(xì)胞或多細(xì)胞異養(yǎng)真核細(xì)胞型微生物。 真菌概念 真菌(fungus)：真核細(xì)胞型微生物 具有典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)（細(xì)胞核、細(xì)胞器、細(xì)胞壁） 無(wú)根、莖、葉，不含葉綠素 細(xì)胞壁含幾丁質(zhì)和（或）纖維素 以腐生或寄生方式攝取養(yǎng)料 能進(jìn)行有性生殖和（或）無(wú)性繁殖 生長(zhǎng)緩慢 概 念 真菌分布廣泛，種類繁多，大多數(shù)無(wú)害，甚至有利。 有些真菌也是造成動(dòng)植物病害的病原，與醫(yī)學(xué)有關(guān)的約數(shù)百種，少數(shù)真菌可以引起人類感染性、中毒性及變態(tài)反應(yīng)性疾病。 近年來(lái)，由于抗菌藥物的廣泛應(yīng)用和或應(yīng)用激素、抗癌藥物導(dǎo)致機(jī)體免疫功能降低等原因，機(jī)會(huì)致病真菌感染也明顯增多。 原核細(xì)胞型微生物與真核細(xì)胞型微生物比較 第一節(jié) 分 類 分 類 真菌門：5個(gè)亞門（傳統(tǒng)） 鞭毛菌亞門 接合菌亞門 子囊菌亞門 擔(dān)子菌亞門 半知菌亞門 （醫(yī)學(xué)相關(guān)： 后4個(gè)亞門） 最新分類：真菌界：4個(gè)門： 接合菌門 擔(dān)子菌門 子囊菌門 壺菌門 第二節(jié) 基本特性 一、形態(tài)特性 真菌比細(xì)菌大，用普通光學(xué)顯微鏡的低倍或高倍鏡就可見。 真菌菌體外有一層堅(jiān)硬的細(xì)胞壁；其細(xì)胞膜含固醇而細(xì)菌無(wú)。 按形態(tài)可將真菌分為單細(xì)胞和多細(xì)胞兩類。 第二節(jié) 基本特性 單細(xì)胞真菌 形態(tài)：圓形或橢圓形，如酵母型和類酵母型真菌。 （1）酵母型真菌：有孢子，無(wú)菌絲 菌絲：無(wú) 繁殖方式：從母細(xì)胞芽生 菌落形態(tài)：與細(xì)菌相似 酵母菌在培養(yǎng)基上菌落形態(tài) 單細(xì)胞真菌 （2）類酵母型真菌：芽生孢子與假菌絲 菌絲：假菌絲 假 菌 絲：長(zhǎng)的芽體可伸進(jìn)培養(yǎng)基內(nèi) 繁殖方式：從母細(xì)胞芽生 菌落形態(tài)：與酵母型相似，由假菌絲聯(lián)結(jié)成假菌絲體，稱為類酵母型菌落 假菌絲 假菌絲：類酵母菌進(jìn)行出芽生殖時(shí)，子母細(xì)胞不立即分離而以狹小的面積相連，這種藕節(jié)狀的細(xì)胞串為假菌絲。 假菌絲與真菌絲明顯不同處在于其兩細(xì)胞間有一細(xì)腰，而不象真正菌絲橫隔處兩細(xì)胞寬度一致。 多細(xì)胞真菌 由菌絲和孢子兩大部分組成 1.菌絲 (hypha) 2.孢子 (spore) （一）菌絲（hypha) 真菌在適宜環(huán)境中，由孢子出芽長(zhǎng)出芽管，逐漸延長(zhǎng)呈絲狀，稱為菌絲（hypha）。菌絲繼續(xù)分支，交織成團(tuán)，稱菌絲體（mycelium）。 菌絲分為營(yíng)養(yǎng)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲中能形成孢子的叫做生殖菌絲。 有些真菌的菌絲具有隔膜，叫有隔菌絲；有些真菌的菌絲無(wú)隔膜，叫無(wú)隔菌絲。 不同形態(tài)的菌絲具有鑒別意義 (1) 單純菌絲 細(xì)長(zhǎng)的管狀組織，有粗有細(xì)分枝或不分枝，有隔或無(wú)隔，有色或無(wú)色。 (2) 球拍狀菌絲 菌絲在隔膜部位一端膨大球拍狀，排列規(guī)整。 (3) 破梳狀菌絲 菌絲一側(cè)有不規(guī)則的梳齒狀凸起，梳齒參差不齊如破梳狀。 (4) 螺旋狀菌絲 菌絲呈彈簧狀，有規(guī)律性旋轉(zhuǎn)狀生長(zhǎng)。 (5) 結(jié)節(jié)狀菌絲 稍膨大的側(cè)枝細(xì)胞、菌絲端細(xì)胞或中間性細(xì)胞彎曲成團(tuán)，互纏成結(jié)。 (6) 鹿角狀菌絲 菌絲頂端呈不規(guī)則分枝，狀如鹿角。 （二）孢子(spore) 孢子（spore）是真菌的繁殖結(jié)構(gòu)。孢子分有性與無(wú)性兩類。孢子與細(xì)菌芽胞不同。 二相真菌：一些真菌可因寄生環(huán)境及培養(yǎng)條件（營(yíng)養(yǎng)、溫度、氧氣等）的不同而交替形成兩種形態(tài)，即在室溫中呈霉菌型，在37攝氏度或體內(nèi)呈單細(xì)胞的酵母型，這類真菌有雙向性，所以稱之為雙態(tài)真菌或二相真菌。如球孢子菌、組織胞漿菌及芽生菌。 二相真菌 孢子 (spore) 孢子是生殖結(jié)構(gòu)，由生殖菌絲產(chǎn)生。是鑒定和分類的依據(jù)。 (1) 無(wú)性孢子 不經(jīng)過(guò)兩性細(xì)胞的配合而產(chǎn)生 ，菌絲上的細(xì)胞分化或出芽生成，病原性真菌大多形成無(wú)性孢子。 (2) 有性孢子 同一菌體或不同菌體上的2個(gè)細(xì)胞融合經(jīng)減數(shù)分裂形成。絕大多數(shù)為非致病性真菌所具有。 無(wú)性孢子分為： 分生孢子：①大分生孢子②小分生孢子 葉狀孢子：①芽生孢子②關(guān)節(jié)孢子③厚膜孢子 孢子囊孢子 有性孢子分為： 卵孢子、接合孢子、子囊孢子及擔(dān)孢子 無(wú)性孢子 1) 葉狀孢子 由菌絲細(xì)胞直接形成 ①芽生孢子 通過(guò)發(fā)芽方式形成圓形或卵形的細(xì)胞 ②關(guān)節(jié)孢子 由菌絲分化成長(zhǎng)方形的幾個(gè)節(jié)段，胞壁稍厚 ③厚膜孢子 是一種休眠細(xì)胞，條件適宜可再發(fā)芽  無(wú)性孢子 2) 分生孢子 常見的一種無(wú)性孢子 形狀、大小、結(jié)構(gòu)、顏色等：分類、鑒定 ① 大分生孢子 體積較大，多細(xì)胞性。孢子呈紡錘形，棍棒狀等。 ② 小分生孢子 體積小，單細(xì)胞性，外壁薄，球形、卵形、梨形以及棍棒狀等。 無(wú)性孢子 3) 孢 (子) 囊孢子 由絲末端形成一種囊狀結(jié)構(gòu)（孢子囊），內(nèi)有許多孢囊孢子。 多細(xì)胞真菌形態(tài) 真菌孢子和細(xì)菌芽胞的區(qū)別 繁殖與培養(yǎng) 真菌的繁殖方式 依靠孢子及菌絲進(jìn)行繁殖:有性繁殖 無(wú)性繁殖 無(wú)性繁殖 1.芽生: 酵母菌及酵母樣真菌 2.裂殖: 以二分裂法進(jìn)行繁殖 3.萌管: 萌發(fā)芽管，芽管伸延后形成菌絲 4.隔殖: 在分生孢子梗某一段落形成一隔膜，隨之原生質(zhì)濃縮而形成一個(gè)新的孢子。孢子可再獨(dú)立繁殖。 真菌的培養(yǎng)特性 真菌的營(yíng)養(yǎng)要求不高 常用沙保培養(yǎng)基 ：蛋白胨、葡萄糖、氯化鈉和瓊脂。 溫度：22～28℃，但某些深部感染的真菌為37℃。 pH：4.0～6.0 生長(zhǎng)速度:較慢 常用的培養(yǎng)基 沙氏瓊脂培養(yǎng)基Sabouraud's Agar 蛋白胨 10.g  葡萄糖  40.0g  瓊脂  20.0g pH值5.6 ± 0.2     蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。  馬丁氏(Martin)培養(yǎng)基(分離真菌用) 配方KH2PO4 1gMgSO4 7H2O 0.5g 蛋白胨 5g葡萄糖 10g瓊脂 15-20g水 1000mLpH 自然此培養(yǎng)液1000mL加1%孟加拉紅1%水溶液3.3mL.臨用時(shí)每100mL培養(yǎng)基中加入1%鏈霉素液0.3mL. 基本原理 葡萄糖主要作為碳源，蛋白胨主要作為氮源，KH2PO4和MgSO4 7H2O作為無(wú)機(jī)鹽，為微生物提供鉀，磷，鎂離子.而孟加拉紅和鏈霉素主要是細(xì)菌和放線菌的抑制劑，對(duì)真菌無(wú)抑制作用，因而真菌在這種培養(yǎng)基上可以達(dá)到優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)，從而達(dá)到分離真菌的目的. 察氏瓊脂Czapek Dox Agar 硝酸鈉 磷酸氫二鉀 硫酸鎂 氯化鉀 硫酸亞鐵 蔗糖 瓊脂 3.0 1.0 0.5 0.5 0.01 30.0 15.0 孟加拉紅培養(yǎng)基（虎紅培養(yǎng)基）Rose Bengal Medium 蛋白胨  葡萄糖 磷酸二氫鉀 硫酸鎂(無(wú)水) 瓊脂  孟加拉紅 氯霉素 5.0 10.0 1.0 0.5  20.0 0.033 0.1 原理：蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氫鉀為緩沖劑；硫酸鎂提供必須的微量元素；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；氯霉素可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)；孟加拉紅作為選擇性抑菌劑可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，并可減緩某些霉菌因生長(zhǎng)過(guò)快而導(dǎo)致菌落漫延生長(zhǎng)。 真菌的培養(yǎng)特性 在沙保培養(yǎng)基上， 3種類型的菌落： 1.酵母型菌落 ： 菌落柔軟、光滑、濕潤(rùn)。鏡下可見單細(xì)胞性的芽生孢子，無(wú)菌絲。隱球菌菌落 2.類酵母型菌落（酵母樣菌落） ： 和酵母型菌落相似，鏡下可見假菌絲。白色念珠菌菌落 3.絲狀型菌落 ： 由多細(xì)胞菌絲體組成的絮狀菌落（一部分向空中生長(zhǎng)，并形成孢子）。絲狀真菌或霉菌菌落。 (菌落較大) 赭曲霉 鐮刀菌及其大分生孢子 黃曲霉菌落形態(tài) 黃曲霉鏡下特征 青霉菌菌落形態(tài) 青霉菌鏡下形態(tài) 鐮刀菌菌落形態(tài) 鐮刀菌鏡下特征 變異與抵抗力 變異性 多次傳代或孵育過(guò)久，容易變異（形態(tài)、結(jié)構(gòu)、菌落性狀、色素以及生理性狀 (毒力)的改變。   抵抗力 熱：不強(qiáng)。孢子一般60℃經(jīng)1h即被殺滅（不同于芽胞）。 干燥、日光、紫外線及多種化學(xué)藥物：耐受性較強(qiáng)。 1%～3%石碳酸、2.5%碘酊、0.1%升汞及10甲醛液：較敏感。 三、 致病性 致病物質(zhì)： 細(xì)胞壁糖蛋白（有內(nèi)毒素樣活性）、毒素、莢膜等。 致病方式： 病原性真菌感染（主要是外源性真菌感染） 條件致病性真菌感染（主要是內(nèi)源性真菌） 真菌變態(tài)反應(yīng)性疾�。ㄆぱ住⑾�喘等） 真菌性中毒（毒素引起） 真菌毒素與腫瘤的關(guān)系（黃曲霉毒素等） 真菌性感染 真菌病 (mycoses)： 由真菌引起感染并表現(xiàn)臨床癥狀者   真菌的致病力比細(xì)菌弱   致病性真菌、條件致病性真菌 原發(fā)性感染： 球孢子菌(Coccidiodes)、 皮炎芽生菌 (Blastomyoes dermatitidis)、 組織胞漿菌(Histoplasma)等 繼發(fā)性感染： 機(jī)體防御機(jī)能顯著低下時(shí)。   致病機(jī)理：真菌的粘附能力，對(duì)免疫系統(tǒng)功能的抑制，胞壁中的酶類 真菌性超敏反應(yīng) 按性質(zhì)分： ①感染性超敏反應(yīng)：感染后， Ⅳ型 ②接觸性超敏反應(yīng)： 吸入或食入， Ⅰ～Ⅳ型 按部位分: ①皮膚超敏反應(yīng): 皮炎、濕疹、蕁麻疹、瘙癢癥等 ②呼吸道超敏反應(yīng): 支氣管哮喘以及過(guò)敏性鼻炎 ③消化道超敏反應(yīng) 真菌毒素中毒 農(nóng)作物、食物或飼料上  表現(xiàn): 1. 肝、腎、神經(jīng)、造血系統(tǒng)損傷 2. 致癌性: 黃曲霉毒素，等 （原發(fā)性肝癌） 免 疫 性 免疫力不強(qiáng)，不能形成穩(wěn)固的病后免疫 1. 抗體的作用 2. 細(xì)胞免疫及超敏反應(yīng) 微生物學(xué)檢查法 取材：淺部：鱗屑、病發(fā)或甲屑 深部：分泌物、排泄物、體液、 痰液及血液 直接鏡檢： 粘稠或含角質(zhì)的標(biāo)本:先加10%KOH，加溫后鏡檢 液體標(biāo)本：離心后鏡檢 培養(yǎng)： 含抗生素的沙保弱培養(yǎng)基 25℃ (絲狀真菌) 37℃ (酵母型真菌) 3.菌種鑒定 (1)絲狀真菌：根據(jù)菌落形成所需要的時(shí)間，在不同條件下生長(zhǎng)的情況，菌落表面及背面的形態(tài)、色素，培養(yǎng)基中有無(wú)色素， 培養(yǎng)物用乳酚棉藍(lán)染色后鏡檢找特征性標(biāo)志結(jié)構(gòu)。 主要是形態(tài)學(xué)的鑒定，如直接涂片觀察，小培養(yǎng)顯微鏡鑒定， 黃曲霉鏡下特征 青霉菌菌落形態(tài) 青霉菌鏡下形態(tài) 鐮刀菌菌落形態(tài) 鐮刀菌鏡下特征 2)酵母菌鑒定： 形態(tài)學(xué)鑒定主要觀察有無(wú)假菌絲產(chǎn)生，如有則為念珠菌屬，如無(wú)則為念珠菌以外的酵母菌;玉米吐溫誘導(dǎo)下特征菌絲及特征孢子的檢驗(yàn)，血清芽管形成 在形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)上還必須進(jìn)行生化鑒定：有標(biāo)準(zhǔn)鑒定，自動(dòng)儀器鑒定，顯色鑒定，其中，自動(dòng)儀器鑒定(如API20C，ID32C等)，顯色鑒定對(duì)于酵母樣真菌的鑒定，特點(diǎn)是快速簡(jiǎn)便; 標(biāo)準(zhǔn)鑒定是按傳統(tǒng)雙歧表流程鑒定(包括糖同化試驗(yàn)，糖發(fā)酵試驗(yàn)，CAFC酚氧化酶試驗(yàn)，尿酶試驗(yàn)，KNO3同化試驗(yàn)，脂肪酸需求試驗(yàn))，是真菌鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)，系統(tǒng)準(zhǔn)確，缺點(diǎn)是程序繁瑣，耗時(shí)長(zhǎng)，與臨床治療不太適應(yīng)。 血清學(xué)玻片凝集試驗(yàn)，動(dòng)物致病性實(shí)驗(yàn)， 血清學(xué)方法檢測(cè)真菌抗原成分     念珠菌感染和曲霉感染的血清學(xué)檢測(cè)可分為抗體檢測(cè)和抗原檢測(cè)兩大類；由于發(fā)生侵襲性真菌病的免疫受損宿主往往缺乏可檢測(cè)到的抗體，或者抗體的產(chǎn)生變化較 大，因此檢測(cè)抗體對(duì)于系統(tǒng)性真菌感染的診斷意義不大，而目前用于臨床的血清學(xué)檢查主要屬于后者，即檢測(cè)血液循環(huán)中的抗原；常用的有下述幾種：         （1）β-D-1，3葡聚糖（BDG）： 是許多真菌細(xì)胞壁的主要成份，如念珠菌、曲霉、鐮刀菌等，但不包括隱球菌和接合菌；由于細(xì)菌、病毒、哺乳動(dòng)物無(wú) 這種成份，因而在循環(huán)血液中測(cè)得時(shí)則提示侵襲性真菌感染，目前已經(jīng)有商品化BDG檢測(cè)的試劑盒。BDG的檢測(cè)，在2小時(shí)內(nèi)可以獲得結(jié)果，因此盡管不能區(qū)分 真菌感染的種類，但是仍然具有重要作用，美國(guó)FDA已經(jīng)批準(zhǔn)Fungitell用于真菌感染的診斷，國(guó)內(nèi)也有相似試劑問(wèn)世，目前在臨床應(yīng)用中。 （2）半乳甘露聚糖（GM）： GM是存在于曲霉和青霉細(xì)胞壁的一種熱穩(wěn)定的多糖，可用于侵襲性曲霉病的臨床診斷。可以使用血清和支氣管肺泡灌洗液檢測(cè) GM，近來(lái)也有人使用尿液和腦脊液等標(biāo)本檢測(cè)。GM檢測(cè)的敏感性為29-100%，而其特異性可超過(guò)90%。由于GM量的多少與組織中真菌含量密切相關(guān)， 因此檢測(cè)GM還可以提示疾病的預(yù)后。 分子生物學(xué)鑒定： 如核酸雜交，DNA探針雜交，PCR擴(kuò)增序列分析，PCR-SSCP單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析，PCR-RFLP限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析，PCR-RAPD隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性分析，PFCG脈沖電泳核型分析等。 防治原則 皮膚癬菌： 注意清潔衛(wèi)生，避免接觸 深部真菌�。喝コ�誘因，提高抵抗力 食物中毒：不食用霉變食品 小 結(jié) 真菌的概念、分類、命名、生物學(xué)特性及與醫(yī)學(xué)相關(guān)真菌所致常見疾病。 真菌按形態(tài)分為單細(xì)胞和多細(xì)胞兩類。真菌細(xì)胞壁中缺乏肽聚糖，而含大分子幾丁質(zhì)，故其不受青霉素或頭胞菌素的作用。 真菌的營(yíng)養(yǎng)要求不高，易于培養(yǎng)。 真菌可以引起人類感染性、中毒性及變態(tài)反應(yīng)性疾病。條件致病性真菌感染近年來(lái)明顯上升，這與臨床上濫用抗菌藥物、應(yīng)用激素及免疫抑制劑和抗癌藥物等導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降有關(guān)，已引起臨床關(guān)注。 真菌的鑒定以形態(tài)學(xué)為主，單細(xì)胞真菌輔以生化及血清學(xué)鑒定TO3紅軟基地

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